产品中心您现在的位置:首页 > 产品展示 > 生化试剂盒 > 微板法 > 土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)试剂盒,微板法

土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)试剂盒,微板法

更新时间:2024-06-06

简要描述:

土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)试剂盒,微板法
土壤亚硝酸还原酶是反硝化作用的关键酶,它是由土壤反硝化细菌产生的一种还原类 酶,参与亚硝酸盐至 NO 的还原反应

土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)试剂盒,微板法

土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)试剂盒,微板法

本试剂盒仅供科研使用 1 土壤亚硝酸还原酶(Solid-Nitrite reductaseS-NiR)试剂盒说明书 (货号:WS0130W 微板法 48 ) 一、产品简介: 土壤亚硝酸还原酶是反硝化作用的关键酶,它是由土壤反硝化细菌产生的一种还原类 酶,参与亚硝酸盐至 NO 的还原反应,它的活性反映了生物降解过程中氮素的转化效率, 为氮素转化规律的研究提供一定的依据。 土壤亚硝酸还原酶可将 NO2-还原为 NO,使样品中参与重氮化反应生成(粉)红色化 合物的 NO2-减少,该(粉)红色物质在 540nm 有最大吸收峰,通过检测 540nm 处吸光 值的变化来反应土壤亚硝酸还原酶的活性。 二、试剂盒组分与配制: 试剂名称 规格试剂名称 保存要求 备注 试剂一 液体 30mL×1 4℃保存 试剂二 液体 55mL×1 4℃保存 有沉淀,临用前混匀即可 试剂三 液体 22mL×1 4℃保存 试剂会出现过饱和,临用前 25水浴, 5min 即可使用 试剂四 A 12mL×1 4℃保存 临用前,可依据待检测样本数量,把 A 液和 B 液等比例混合成无色的反应 mix (注意观察,若变粉色,则不能使用)两天之内用完。 B 12mL×1 标准品 粉体 mg×1 4℃保存 若重新做标曲,则用到该试剂 三、所需的仪器和用品: 酶标仪、96 孔板、天平、水浴锅、低温离心机、可调式移液器。 四、土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)的测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本制备 取新鲜土样风干或者 37 度烘箱风干,先粗研磨,过 40 目筛网,备用。 【注】:土壤风干,减少土壤中水分对于实验的干扰;土壤过筛,保证取样的均匀细腻; 2、测定步骤 ① 酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 540nm② 在 EP 管中依次加入: 试剂名称(μL测定管 无基质对照管 无土对照管 (仅做一次) 土样(g0.1 0.1 试剂一 400 400 蒸馏水 800 1200 800 试剂二 500 500 500 混匀,且务*用封口膜封口,25℃,培养 24h 试剂三 200 200 200本试剂盒仅供科研使用 2 混匀,12000rpm4℃离心 10min,上清液待用。 ③ 显色反应,②步得到的上清液用蒸馏水稀释 50 倍后,在 96 孔板中依次加: 上清液 20 20 20 反应 mix 200 200 200 混匀,25℃反应 5min(准确时间),立即540nm 处读取 A 值,A=A 无土对照管-A 测定管-A 无基质对照管),(每个样本需做一个自身 对照)。 【注】:若A 值低于 0.01,可增加土壤样本取样质量 W(如由 0.1g 增至 0.25g),则改变 后的 W 需带入公式重新计算。 五、结果计算: 1、标准曲线方程:y = 2.2688x - 0.0011x 为标准品浓度(μmoL/mL),y 为吸光值A2、单位定义:每克土壤每天还原 1μmoL NO2 ˉ量为一个酶活力单位。 S-NiR(μmoL/d/g 土壤)=[(A+0.0011)÷2.2688×V1]÷W÷T×D =0.84×(A+0.0011)÷W×50 3、单位定义:每克土壤每天还原 1μg NO2 ˉ量为一个酶活力单位。 S- NiR(μg/d/g 土壤)=[(A+0.0011)÷2.2688×V1]÷W÷T×46×D =38.64×(A+0.0011)÷W×50 V1---反应体系总体积,1900μL=1.9mLT---反应时间,24h=1dW---土样实际质量,gD---稀释倍数,50 倍; 标准品的分子量---69NO2 -的分子量---46附:标准曲线制作过程: 1 制备标准品母液(100μmol/mL):把标准品*全溶解于 1mL 蒸馏水中(母液需在两 天内用且-20℃保存)。 2 把母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度的标准品:0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5. μmol/mL。也 可根据实际样本来调整标准品浓度。 3 依据显色反应阶段的测定管的加样顺序操作,根据结果即可制作标准曲线。

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
上海宇淳生物科技有限公司

上海宇淳生物科技有限公司

地址:上海市南航公路1981弄72号

版权所有:上海宇淳生物科技有限公司  备案号:沪ICP备19012414号-1  总访问量:180835  站点地图  技术支持:环保在线  管理登陆