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Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)试剂盒,微板法

更新时间:2024-06-04

简要描述:

Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)试剂盒,微板法
谷*酸脱氢酶广泛分布于生物体中,在氨同化和转化成有机氮化合物的代谢中起重要作 用。其辅酶是 NADH 或 NADPH,在动植物种两种辅酶都有存在

Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)试剂盒,微板法

Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)试剂盒,微板法

一、产品简介: 谷*酸脱氢酶广泛分布于生物体中,在氨同化和转化成有机氮化合物的代谢中起重要作 用。其辅酶是 NADH NADPH,在动植物种两种辅酶都有存在,而以 NADH-谷*酸脱氢 酶(EC 1.4.1.2)活力为主。 本试剂盒提供一种快速灵敏的检测方法,样品中的 NADH-谷*酸脱氢酶特异性作用于底 物谷*酸并产生 NADH,同时与显色剂反应生成黄色物质,该物质在 450nm 处有最大吸收 峰,进而得到 NADH-GDH 的酶活性大小。 二、试剂盒的组成和配制: 试剂名称 规格 保存要求 备注 提取液 液体70mL×14℃保存 试剂一 液体10mL×14℃保存 浓度为1M 试剂二 液体5mL×14℃保存 试剂三 液体2.2mL×14℃保存 标准品 粉剂mg×14℃保存 若重新做标曲,则用到该试剂 注:粉剂量在 mg 级别,使用前用手甩几次或者进行离心,打开直接加入要求的试剂即可。 三、所需的仪器和用品: 可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、 研钵、冰和蒸馏水。 四、NADH-谷*酸脱氢酶(NADH-GDH)活性测定: 1、样本制备: ① 组织样本: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆。12000rpm 4℃离心 10min,取上清 液,置冰上待测。(或按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取) ② 细菌/细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液; 超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。(或按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL500~10001 的比例进行提取) ③ 液体样本:直接检测。 2、上机检测① 可见分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 450nm,蒸馏水调零。 ② 在 1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)中依次加入: 试剂名称(μL测定管 提取液 320 试剂一 200 试剂二 80 样本 160 试剂三 40 混匀,立即 450nm 下读取 A1 值,15min 后读取 A2 值。ΔA=A 2-A1

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