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Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)试剂盒

更新时间:2024-06-03

简要描述:

Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)试剂盒
α-木糖苷酶(EC 3.2.1.177)是一类木聚糖降解水解酶,存在于植物、细菌和真菌等生物 体,促使非还原末端α-D-木糖残基的水解,释放出α-D-木糖。

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α-木糖苷酶(α- xylosidase)活性测定试剂盒说明书 (货号:WS3170F 分光法 24 样) 一、产品简介 : α-木糖苷酶(EC 3.2.1.177)是一类木聚糖降解水解酶,存在于植物、细菌和真菌等生物 体,促使非还原末端α-D-木糖残基的水解,释放出α-D-木糖。 α-木糖苷酶催化对硝基*酚-α-D-木糖苷产生对硝基*酚(PNP),该产物在 405nm 有特征吸收峰,通过测定 405nm 光吸收增加速率,即可计算α-木糖苷酶活性。 二、试剂盒的组成和配制: 试剂名称 规格 保存要求 备注 提取液 液体 30mL×1 4℃保存 试剂一 粉剂 mg×1 4℃保存 用前甩几下使试剂落入底部, 再加 2mL 蒸馏水溶解备用。 试剂二 液体 6mL×1 4℃保存 试剂三 27mL×1 4℃保存 标准品 粉剂×1 4℃保存 若重新做标曲,则用到该试剂。 三、所需的仪器和用品: 可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、可调式移液器、低温离心机、天平、 研钵、冰和蒸馏水。 四、α-木糖苷酶活性测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本的制备: ① 组织样本:取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.5g),加入 1mL 提取液,进行冰 浴匀浆。12000rpm4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 比例提取。 ② 细菌或细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细 胞,加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);12000rpm4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】若增加样本量,可按照细菌或细胞数量(104 ):提取液体积(mL)500~10001 的比例提取。 ③ 液体样本:直接检测。若浑浊,离心后取上清检测。 2、上机检测: ① 可见分光光度计预热 30min,调节波长至 405nm,蒸馏水调零。 ② 在 EP 管中依次加入: 试剂名称(μL测定管 对照管 样本 30 30 试剂一 75 蒸馏水 75 试剂二 135 135 迅速混匀,40℃保温 20min 试剂三 540 540 混匀,取全部澄清液体转移至 1mL 玻璃比色皿中,于 405nm 处测定吸光值 AΔA=A 测定-A 对照(每个测定

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