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淀粉分支酶(SBE)试剂盒

更新时间:2024-06-13

简要描述:

淀粉分支酶(SBE)试剂盒
淀粉分支酶(SBE,EC 2.4.1.18)是参与支链淀粉合成的关键酶之一,在淀粉生物合 成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。

淀粉分支酶(SBE)试剂盒

淀粉分支酶(SBE)试剂盒

本试剂盒仅供科研使用 1 淀粉分支酶(Starch branching enzymeSBE)试剂盒说明书 (货号:WS9350F 分光法 24 样) 一、产品简介: 淀粉分支酶(SBEEC 2.4.1.18是参与支链淀粉合成的关键酶之一,在淀粉生物合 成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。 SBE 可使底物含量减少,从而降低底物与碘显色剂形成的在 660nm 有最大吸收峰的蓝 色复合物,一定时间内吸光度下降的百分率可以反映 SBE 酶活性的大小。 二、试剂盒组分与配制: 试剂名称 规格 保存要求 备注 提取液 液体 30mL×1 4℃保存 试剂一 液体 8mL×1 4℃保存 试剂二 粉体 mg×1 4℃保存 临用前甩几下,使试剂落入底部,先加 1mL 蒸馏水混合均匀,再徐徐加入煮沸 95℃)的蒸馏水 5mL,继续煮沸 2min呈透明溶解状态,待冷却后使用。 试剂三 液体 30mL×1 4℃保存 试剂四 液体 1.5mL×1 4℃保存 三、所需的仪器和用品: 可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、水浴锅、台式离心机、可调式移液 器、研钵、冰、蒸馏水。 四、淀粉分支酶(SBE)活性测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本制备: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆。 4×12000rpm 离心 10min取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取 2、上机检测: ① 可见分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 660nm,蒸馏水调零。 ② 在 EP 管中依次加入: 试剂名称(μL测定管 对照管 样本 15 1595℃煮沸 10min 的酶液) 试剂一 150 150 试剂二 75 75 37℃孵育 10min,沸水浴 2min,流水冷却至室温。 试剂三 600 600 试剂四 30 30 混匀,显色 10min 后,全部液体转移至 1mL 玻璃比色皿中,于 660nm 处读取吸光值 AΔAA 对照-A 测定。 【注】若ΔA 差值较小,可加大样本量。则改变后的加样量 V1 需重新代入公式计算。 五、结果计算:本试剂盒仅供科研使用 1、按照蛋白浓度计算 酶活定义:以波长 660nm 的吸光度下降百分率表示,每毫克蛋白每降低 1%碘蓝值为 一个酶活性单位。 SBE 活性(U/mg prot)= ΔA /A 对照管×100%÷V1×Cpr=66.67×ΔA /A 对照管÷Cpr 2、按照样本鲜重计算 酶活定义:以波长 660nm 的吸光度下降百分率表示,每克组织每降低 1%碘蓝值为一 个酶活性单位。 SBE 活性(U/g 鲜重)= ΔA /A 对照管×100%÷(W×V1÷V)= 66.67×ΔA /A 对照管÷W V----加入提取液体积,1 mLV1----加入样本体积,0.015mLW----样本质量,gCpr----样本蛋白质浓度,mg/mL,建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。 2

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