更新时间:2024-06-07
土壤速效磷试剂盒,微板法植物吸收的磷主要是 H2PO4 -的形态,因此土壤中速效磷含量是评价土壤对作物磷供应 能力的一种手段,对于施肥有着直接的指导意义。
土壤速效磷试剂盒,微板法
土壤速效磷试剂盒,微板法
本试剂盒仅供科研使用 1 土壤速效磷含量试剂盒说明书 (货号:WS2430W 微板法 96 样) 一、产品简介: 植物吸收的磷主要是 H2PO4 -的形态,因此土壤中速效磷含量是评价土壤对作物磷供应 能力的一种手段,对于施肥有着直接的指导意义。 本试剂盒采用钼锑抗混合显色剂还原土壤中的速效磷,使黄色的钼锑抗还原为磷钼兰, 在 700nm 下吸光值的大小与土壤中速效磷的含量成正比。 二、试剂盒组成和配制: 试剂名称 规格 保存要求 备注 提取液 粉体 g×2 瓶 常温保存 临用前取一瓶转移全部粉末至盛有 450mL 蒸馏水的蓝盖瓶中,再向原试剂 瓶中加入50mL蒸馏水涮洗瓶子后全部 转移至蓝盖瓶中,重复操作一次。总体 积为 0.55L,混匀溶解后 15 天内用完。 试剂一 粉体 g×1 瓶 常温保存 试剂二 A:粉体 mg×1 支 B:液体 8mL ×1 瓶 C:粉体 mg×4 支 常温保存 临用前向 A 中加 1.3mL 蒸馏水溶解后, 全部加入 B 中,再加 3.84mL 蒸馏水, 混匀得到 AB 液(常温可保存 15 天)。 每支 C 中加入 3mLAB 液混合,得到试 剂二(一天内用完)。 标准品 液体 mL×1 支 常温保存 若重新做标曲,则用到该试剂 【注】:全程操作需无磷环境;试剂配置最好用新的枪头和玻璃移液器等,也可以用一次性塑料器皿, 免磷污染。 三、所需的仪器和用品: 酶标仪、96 孔板、可调试移液器、水浴锅、震荡器。 四、土壤速效磷含量测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本制备: 称取通过 40 目筛的风干土样 0.5g(精确称量至 0.001g)于 10mL 有盖离心管中,加 入一勺(约 0.05g)的试剂一,加入 10mL 的提取液,盖紧,水平放置在震荡器上室温 200rpm 往复震荡培养 30min,用无磷滤纸过滤,滤液收集至新的 10mL 离心管中,立即进行测定。 2、上机检测: ① 酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 700nm。 ② 在 EP 中依次加入下列试剂: 试剂名称(μL) 测定管 空白管(仅做一次) 样本 200 提取液 200 试剂二 (逐滴加入,防止溢出) 100 100 观察产生大量气泡,停止冒泡后,盖上管盖上下摇晃后小 心打开盖子放气,重复操作 2-3 次,将气泡全部排出。本试剂盒仅供科研使用 2 蒸馏水 700 700 混匀,室温静置 30min 后,取出 200μL 至 96 孔板中,于 700nm 下读取各管吸光值 A,△A=A 测定-A 空白。 五、结果计算: 1、标准曲线方程:y = 0.0236x + 0.0028,x 是标准品摩尔质量(μg/mL), y 是△A。 2、按样本质量计算: 土壤速效磷含量(μg/g )=[(△A-0.0028)÷0.0236×V]÷W =423.7×(△A-0.0028) V---加入提取液体积,10mL; W---样本质量,0.5g。 附:标准曲线制作过程: 1 制备标准品母液(50μg/mL 的磷)。 2 把母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度的标准品:0, 2, 4, 6, 8, 10. μg/mL。也可根据实际样本来调整 标准品浓度。 3 依据测定管的操作方法在 EP 管中加入不同浓度的标准品 200μL,提取液 200μL,试剂二 100μL, 蒸馏水 500μL。根据结果即可制作标准曲线。