土壤速效磷试剂盒

土壤速效磷试剂盒

土壤速效磷试剂盒

本试剂盒仅供科研使用 1 土壤速效磷含量试剂盒说明书 （货号：WS2430F 分光法 48 样） 一、产品简介： 植物吸收的磷主要是 H2PO4 -的形态，因此土壤中速效磷含量是评价土壤对作物磷供应 能力的一种手段，对于施肥有着直接的指导意义。 本试剂盒采用钼锑抗混合显色剂还原土壤中的速效磷，使黄色的钼锑抗还原为磷钼兰， 在 700nm 下吸光值的大小与土壤中速效磷的含量成正比。 二、试剂盒组成和配制： 试剂名称 规格 保存要求 备注 提取液 粉体 g×1 瓶 常温保存 临用前转移全部粉末至盛有 450mL 蒸 馏水的蓝盖瓶中，再向原试剂瓶中加入 50mL 蒸馏水涮洗瓶子后全部转移至蓝 盖瓶中，重复操作一次。总体积为 0.55L，混匀溶解后 15 天内用完。 试剂一 粉体 g×1 瓶 常温保存 试剂二 A:粉体 mg×1 支 B:液体 4mL ×1 瓶 C:粉体 mg×2 支 常温保存 临用前向 A 中加 0.65mL 蒸馏水溶解 后，全部加入 B 中，再加 1.92mL 蒸馏 水，混匀得到 AB 液（常温可保存 15 天）。每支 C 中加入 3mLAB 液混合， 得到试剂一（一天内用完）。 标准品 液体 mL×1 支 常温保存 若重新做标曲，则用到该试剂 【注】：全程操作需无磷环境；试剂配置最好用新的枪头和玻璃移液器等，也可以用一次性塑料器皿， 避免磷污染。 三、所需的仪器和用品： 分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、可调试移液器、水浴锅、震荡器。 四、土壤速效磷含量测定： 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验 样本和试剂浪费！ 1、样本制备： 称取通过 40 目筛的风干土样 0.5g（精确称量至 0.001g）于 10mL 有盖离心管中，加入 一勺（约 0.05g）的试剂一，加入 10mL 的提取液，盖紧，水平放置在震荡器上室温 200rpm 往复震荡培养 30min，用无磷滤纸过滤，滤液收集至新的 10mL 离心管中，立即进行测定。 2、上机检测： ① 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 700nm，蒸馏水调零。 ② 在 EP 中依次加入下列试剂： 试剂名称（μL） 测定管 空白管（仅做一次） 样本 200 提取液 200 试剂二 （逐滴加入，防止溢出） 100 100 观察产生大量气泡，停止冒泡后，盖上管盖上下摇晃后小心 打开盖子放气，重复操作 2-3 次，将气泡全部排出。本试剂盒仅供科研使用 2 蒸馏水 700 700 混匀，室温静置 30min 后，全部液体转移至 1mL 玻璃比色皿 （光径 1cm）中，于 700nm 下读取各管吸光值 A， △A=A 测定-A 空白。 五、结果计算： 1、标准曲线方程：y = 0.0433x -0.0021，x 是标准品摩尔质量（μg/mL）, y 是△A。 2、按样本质量计算： 土壤速效磷含量(μg/g )=[(△A+0.0021)÷0.0433×V]÷W =230.9×(△A+0.0021) V---加入提取液体积，10mL； W---样本质量，0.5g。 附：标准曲线制作过程： 1 制备标准品母液（50μg/mL 的磷）。 2 把母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 2, 4, 6, 8, 10. μg/mL。也可根据实际样本来调整 标准品浓度。 3 依据测定管的操作方法在 EP 管中加入不同浓度的标准品 200μL，提取液 200μL，试剂二 100μL， 蒸馏水 500μL。根据结果即可制作标准曲线。