产品中心您现在的位置:首页 > 产品展示 > 生化试剂盒 > 微板法 > 纤维素酶(S-CL)β-1,4葡聚糖酶试剂盒微板法

纤维素酶(S-CL)β-1,4葡聚糖酶试剂盒微板法

更新时间:2024-06-06

简要描述:

纤维素酶(S-CL)β-1,4葡聚糖酶试剂盒微板法
纤维素是植物残体进入土壤的碳水化合物的重要组分之一。在土壤纤维素酶作用下,可 以催化纤维素水解生成纤维二糖、葡萄糖等还原糖

纤维素酶(S-CL)β-1,4葡聚糖酶试剂盒微板法

纤维素酶(S-CL)β-1,4葡聚糖酶试剂盒微板法

本试剂盒仅供科研使用 1 土壤纤维素酶(Solid-cellulaseS-CL)活性测定试剂盒说明书 (货号:WS8030W 微板法 96 ) 一、产品简介: 纤维素是植物残体进入土壤的碳水化合物的重要组分之一。在土壤纤维素酶作用下,可 以催化纤维素水解生成纤维二糖、葡萄糖等还原糖,所以,纤维素酶是碳素循环中的一个 重要酶。本试剂盒采用3,5-二硝基水杨酸与终产物还原糖反应生成棕红色物质,在540nm 处有特征吸收峰,进而得到土壤纤维素酶活性。 二、试剂盒组分与配制: 试剂名称 规格 保存要求 备注 试剂一 粉体 mg×2 4℃保存 临用前每瓶加入 55mL 试剂二, 80℃水浴,搅拌至溶解,待用。 试剂二 液体 110mL×2 4℃保存 试剂三 液体 20mL×1 4℃保存 标准品 粉剂 mg×1 4℃保存 若重新做标曲,则用到该试剂。 三、所需仪器和用品: 酶标仪、96 孔板、水浴锅或恒温振荡培养箱、可调式移液器、蒸馏水。 四、土壤纤维素酶(S-CL)活性测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本制备: 取新鲜土样或干土(风干或者 37 度烘箱风干),先粗研磨,过 40 目筛网备用。 【注】:土壤风干,减少土壤中水分对于实验的干扰;土壤过筛,保证取样的均匀细腻; 2、上机检测: ① 培养:在 EP 管依次加入: 试剂名称(μL测定管 对照管 土样(g0.3-0.5 0.3-0.5 试剂一 1000 试剂二 1000 充分混匀,40℃培养 24 小时(振荡培养或间隔一段时间手动振 荡混匀几下),12000rpm25℃离心 10min,上清液待用 ② 酶标仪预热 30min 以上,调节波长为 540nm③ 显色反应:在 EP 管中依次加入: 上清液 200 200 试剂三 100 100 混匀,95℃水浴 5min,待冷却后,取 200μL 96 孔板中, 540nm 处读取吸光值 AA=A 测定管-A 对照管。 【注】:1.ΔA 较小,可延长 40的孵育时间 T(如 48 小时或更长),或增加土样质 W。则改变后的 V1 或土壤重量 W 需代入计算公式重新计算。 2.若测定管 A 值大于 1.5 A 大于 1歩显色反应步骤中的上清液可用蒸馏 水稀释,则稀释倍数 D 代入公式计算。本试剂盒仅供科研使用 2 五、结果计算: 1、标准曲线方程:y = 15.161x - 0.0701x 为标准品质量(mg),y A2、单位定义:每天每克土样中产生 1μg 还原糖定义为一个酶活力单位。 土壤纤维素酶(S-CL)活力(μg/d/g 土样)=[(ΔA+0.0701)÷15.161×103×(V÷V1)]÷W÷T =329.8×(ΔA+0.0701)÷W V---反应总体积,1000μLV1---显色反应中上清液体积,200μLT---反应时间,24h=1dW---土壤样本实际取样量,g附:标准曲线制作过程: 1 制备标准品母液(1mg/mL):向标准品 EP 管里面加入 1mL 蒸馏水(母液需在两天 内用且-20℃保存)。 2 把母液稀释成六个浓度梯度的标准品:0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5. mg/mL。也可根据实 际样本来调整标准品浓度。 3 在显色反应阶段,按照测定管加样表操作,依据结果即可制作标准曲线。

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
上海宇淳生物科技有限公司

上海宇淳生物科技有限公司

地址:上海市南航公路1981弄72号

版权所有:上海宇淳生物科技有限公司  备案号:  总访问量:197182  站点地图  技术支持:环保在线  管理登陆