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土壤漆酶(S-Lac)活性检测试剂盒,微板法

更新时间:2024-05-23

简要描述:

土壤漆酶(S-Lac)活性检测试剂盒,微板法
土壤漆酶(Laccase)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,具有较强的氧化还原能力。

土壤漆酶(S-Lac)活性检测试剂盒,微板法

土壤漆酶(S-Lac)活性检测试剂盒,微板法

本试剂盒仅供科研使用 1 土壤漆酶(Soil LaccaseSL)试剂盒说明书 (货号:WS5230W 微板法 48 样) 一、产品简介: 土壤漆酶(Laccase)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,具有较强的 氧化还原能力。土壤漆酶分解底物 ABTS 产生 ABTS 自由基,在 420nm 处的吸光系数远 大于底物 ABTS,测定 ABTS 自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。 二、试剂盒组分与配制 试剂名称 规格 保存要求 备注 试剂一 液体 25mL×1 4℃保存 试剂二 粉剂×1 4℃保存 临用前甩几下,使粉剂落到底部, 再加 6mL 蒸馏水充分溶解,4保存一周,若变色则不能使用。 三、所需的仪器和用品: 酶标仪、96 孔板、可调式移液器、天平、低温离心机、振荡培养箱。 四、土壤漆酶活性测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本制备 取新鲜土样风干或者 37 度烘箱风干,先粗研磨,过 40 目筛备用。 2、上机检测: ① 酶标仪预热 30min,调节波长到 420nm② 在 EP 管中依次加入: 试剂名称(μL测定管 对照管 样本(g0.02 0.02 试剂一 200 300 试剂二 100 37℃振荡反应 10min12000rpm4℃离心 5min,分别取 上清 200μL 转移至 96 孔板中,于 420nm 处读取吸光值 AA=A 测定-A 对照(每个样本做一个自身对照)。 A 差值较小,可增加样本量或延长反应时间 T,则改变后的样本质量 W 和反应时间 T 则代入计算公式重新计算。 五、结果计算: 酶活定义:每克土壤每分钟氧化 1nmol 底物 ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位(U)。 SL 活性(nmol/min /g 土样)=[A÷(ε×d)×V×109]÷W÷T=1.67×A÷W ε---ABTS 摩尔消光系数:36×103L/mol/cmd---比色皿光径,0.5cmV---反应总体积,0.3mL=3×10-4LW---样本质量,gT---反应时间,10min

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