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果糖含量试剂盒(间ben二酚比色法)

更新时间:2024-06-13

简要描述:

果糖含量试剂盒(间ben二酚比色法)
果糖是一种较为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的 浆汁和蜂蜜中。

果糖含量试剂盒(间ben二酚比色法)

果糖含量试剂盒(间ben二酚比色法)

本试剂盒仅供科研使用 1 果糖(fructose)含量(间*二酚法)试剂盒说明书 (货号:WS5050F 分光法 48 样) 一、产品简介: 果糖是一种较为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的 浆汁和蜂蜜中。本试剂盒检测果糖,是通过果糖与间*二酚反应,生成有色物质,在 480nm 下有特征吸收峰,进而求得待检测样本果糖含量。 二、试剂盒组分与配制: 试剂名称 规格 保存要求 备注 试剂一 液体 35 mL×1 4℃保存 试剂二 液体 20mL×1 4℃保存 标准品 粉剂 mg×1 4℃保存 临用前加1mL蒸馏水溶解, 1mg/mL 果糖溶液 三、所需的仪器和用品: 可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、水浴锅、可调式移液器、研钵、乙醇。 四、果糖含量的测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 建议:可取两个样本做适当梯度的稀释(如 2-5 倍),确定适合本次实验的稀释倍数 D1、样本制备 ① 组织样本: 称取 0.1g 样本(若是干样,如烘干烟叶等可取 0.05g;若是水分充足的样本可取 0.2g), 先加入 0.8mL 80%乙醇(自备:取 80mL 乙醇溶于 20mL 蒸馏水中),冰浴匀浆,倒入 有盖离心管中,再用 80%乙醇冲洗研钵并转移至同一 EP 管中,使 EP 管中粗提液终体积 定容为 1.5mL(若用自动研磨机可直接加入 1.5mL 80%乙醇研磨);置 50℃水浴 20min (封口膜缠紧,防止液体散失,且间隔 2min 振荡混匀一次),冷却后(若有损失,可加 80%乙醇补齐至 1.5mL),12000rpm,室温离心 10min,取上清液备用。 ② 液体样本: 澄清的液体样本直接检测,若浑浊则需 12000rpm,室温离心 10min,取上清液备用。 2、 上机检测 1 可见分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 480nm,蒸馏水调零。 ② 在 EP 管中依次加入下列试剂: 试剂(μL测定管 标准管 (仅做一次) 空白管 (仅做一次) 样本 90 标准品 90 蒸馏水 90 试剂一 630 630 630 试剂二 180 180 180 混匀,95℃水浴反应 30min(可用封口膜缠紧,以防止水 分散失),冷却全部液体转移至 1mL 玻璃比色皿中,在 480nm 分别读取吸光值 AA=A 测定-A 空白。本试剂盒仅供科研使用 2 【注】:如果ΔA 大于 2,需要将样本用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数 D五、结果计算: 1、按样本鲜重计算: 果糖含量(mg/g 重量)=(C 标准×V1)×A÷(A 标准-A 空白)÷(W×V1÷V)×D =1.5×A÷(A 标准-A 空白)÷W×D 2、按液体体积计算: 果糖含量(mg/mL 液体)=(C 标准×V1)×A÷(A 标准-A 空白) ÷V1×D =A÷(A 标准-A 空白) ×D C 标准---果糖标准品浓度,1mg/mLV---加入提取液体积,1.5mLV1---加入样本积,0.09mLW---样本鲜重,gD---稀释倍数。

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