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蔬菜中硝酸盐含量试剂盒,微板法

更新时间:2024-06-12

简要描述:

蔬菜中硝酸盐含量试剂盒,微板法
用 pH9.6~9.7 碱性缓冲液提取样品中硝酸根离子,同时加活性炭去除色素类,加沉 淀剂去除蛋白质及其他干扰物质

蔬菜中硝酸盐含量试剂盒,微板法

蔬菜中硝酸盐含量试剂盒,微板法

本试剂盒仅供科研使用 1 蔬菜中硝酸盐含量测定试剂盒说明书 (货号:WS0440W 微板法 96 样) 一、产品简介: pH9.69.7 碱性缓冲液提取样品中硝酸根离子,同时加活性炭去除色素类,加沉 淀剂去除蛋白质及其他干扰物质,利用硝酸根离子和亚硝酸根离子在紫外区 219nm 具有等吸收波长的特性,测定提取液的吸光度,其测得结果为硝酸盐和亚硝酸盐吸光度 的总体,鉴于新鲜蔬菜、水果中亚硝酸盐含量甚微,可忽略不计。测定结果为硝酸盐的 吸光度,依据从标准曲线计算出硝酸盐含量。 二、试剂盒的组成和配制: 试剂名称 规格试剂名称 保存要求 备注 活性炭 1g×1 室温 试剂一 液体 6mL×1 4℃保存 试剂二 液体 2mL×1 4℃保存 试剂三 液体 2mL×1 4℃保存 标准品 液体×1 4℃保存 若重新做标曲,则用到该试剂 三、所需的仪器和用品: 酶标仪、96 UV 板(用于紫外光波长下的测定)、蒸馏水、常温离心机,可调式往返 振荡机。 四、蔬菜中硝酸盐含量测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解样本自身情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本处理: ① 组织样本:取 0.2g 组织样本(若样本较大可研磨粉碎后取样),加 1mL 的蒸馏水 研磨匀浆,全部转移至 2mLEP 管中,再依次加入 0.06mL 试剂一和 10mg 的活性炭 混匀,放置于可调式往返振荡机上(200 /min)振荡 30min(如无此仪器需间隔 3min 手动晃动几秒)。再依次加入 0.02mL 的试剂二和 0.02mL 的试剂三,充分混匀,加 0.9mL 蒸馏水定容至 2mL,混匀后室温放置 5min12000rpm 室温离心 5min,澄清 的上清液做为样本待检上清液;空白待检上清液制备过程除了不加样本之外,其他 操作步骤同组织样本制备过程。 2、上机检测: 1 酶标仪预热 30min 以上。 2 96 UV 板中依次加入: 试剂名称(μL) 测定管 空白管(仅做一次) 样本待检测上清液 200 空白待检测上清液 200 混匀, 于 219nm 分别读吸光值 AA=A 测定管-A 空白管。 【注】 若 A 值超过 1.2,可用蒸馏水对待检上清液稀释,稀释倍数 D 代入计算公式重新计算; 五、结果计算: 1、标准曲线方程:y = 0.0348x + 0.0029x 为标准品浓度(μg/mL),y 为吸光值A。本试剂盒仅供科研使用 2 2、蔬菜中硝酸盐(NO3 -)含量(μg/g mg/Kg)=(A-0.0029)÷ 0.0348×V×D÷W =28.74×(A-0.0029)×V×D÷W V---最终待测总体积,2mLW---取样质量,gD---稀释倍数,未稀释即为 1本标准适用于新鲜蔬菜及水果中硝酸盐含量的测定。本方法检出限为 1.2mg/kg附:标准曲线制作过程: 1 标准品母液(500μg/mL): 2 用蒸馏水把母液稀释成六个浓度梯度的标准品:0, 4, 8, 12,16, 20. μg/mL。也可根据 实际样本来调整标准品浓度。 3 直接取 200μL 不同浓度的标准品至 96 UV 板中,于 219nm 分别读吸光值 A,根 据结果即可制作标准曲线。

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