土壤铵态氮试剂盒-国标法,微板法

土壤铵态氮试剂盒-国标法,微板法

土壤铵态氮试剂盒-国标法,微板法

本试剂盒仅供科研使用 1 土壤铵态氮试剂盒说明书 （货号：WS0230W 微板法 96 样） 一、产品简介： 氮元素以铵根离子的形态存在并流通于土壤中，为土壤铵态氮。其溶解度大，易被植物 吸收，所以常被用作化肥。本试剂盒采用氯*钾溶液浸提，浸提液中的铵态氮在强碱的环 境下与次氯酸盐和*酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液颜色稳定。其在 625nm 处有 特征吸收峰，吸光值与铵态氮含量成正比。 二、试剂盒组分与配制： 试剂名称 规格试剂名称 保存要求 备注 提取液 液体 110mL×1 瓶 4℃保存 试剂一 粉剂×2 瓶 4℃保存 用前每瓶加入 6mL 蒸馏水，现配现用 试剂二 A：液体 10mL×1 瓶 B：液体μL×1 支 4℃保存 用前向 A 液中加入 100μL 的 B 液，混 匀后作为试剂二使用。仍 4℃保存。 试剂三 液体 2mL×1 瓶 4℃保存 标准品 液体×1 支 4℃保存 若重新做标曲，则用到该试剂 三、所需的仪器和用品： 酶标仪、96 孔板、常温离心机、移液器、蒸馏水、振荡仪。 四、土壤铵态氮的测定： 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样本情况，熟悉实验流程，避免实验 样本和试剂浪费！ 1、样本制备： 称取约 0.1g 新鲜土样，加入 1mL 提取液，涡旋混匀，室温振荡提取 1h，12000rpm 常温离心 10min，取上清液。 2、上机检测： ① 酶标仪预热 30min，设置温度在 25℃，设定波长为 625nm。 ② 所有试剂在使用前均须在室温或 25℃水浴锅中温育 10min。 ③ 在 96 孔板中按照下表依次加入试剂： 试剂（μL） 测定管 空白管（仅做一次） 样本 20 提取液 20 试剂一 100 100 试剂二 100 100 充分混匀，25℃静置 1h 试剂三 20 20 充分混匀，于 625nm 处测定吸光值，分别记为 A 测定管和 A 空白管， △A=A 测定管-A 空白管。 【注】若△A 在零附近徘徊，可增加土壤质量 W（如增至 0.3g），或在反应阶段增加样本加 样量 V1（如增至 80μL，则试剂一和试剂二分别减至 70μL，总体积保持不变），改变 后的 W 和 V1 需重新代入公式计算。本试剂盒仅供科研使用 五、结果计算： 1、标准曲线：y = 6.0486x - 0.0063；x 是标准品质量（μg），y 是△A。 2、NH4+ -N 含量(mg/kg 鲜土)=[(△A+0.0063)÷ 6.0486]÷(W×V1÷V) =8.27×(△A+0.0063)÷W V1---反应体系中加入样本体积，0.02mL； V---加入提取液体积，1mL； W---样本质量，g。 附：标准曲线制作过程： 1 标准品母液（1mg/mL 的氮）： 2 把母液用蒸馏水稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 2,4,6, 8,10 μg/mL。也可根据实际 样本来调整标准品浓度。 3 按照测定管操作表加样操作，依据结果制作标准曲线。 2