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土壤硝态氮试剂盒-国标法,微板法

更新时间:2024-06-06

简要描述:

土壤硝态氮试剂盒-国标法,微板法
硝态氮是指硝酸盐中所含有的氮元素,土壤中的有机物分解生成铵盐,被氧化后变为 硝态氮。

土壤硝态氮试剂盒-国标法,微板法

土壤硝态氮试剂盒-国标法,微板法

本试剂盒仅供科研使用 1 土壤硝态氮试剂盒说明书 (货号:WS9130W 微板法 96 样) 一、产品简介: 硝态氮是指硝酸盐中所含有的氮元素,土壤中的有机物分解生成铵盐,被氧化后变为 硝态氮。土壤中硝态氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,其含量直接关系到作物的产 量与品质。 土壤浸出液中硝酸根离子在 220nm 有明显光吸收而在 275nm 波长处没有吸收峰,通 过测定土壤浸出液在 275nm 处的吸光度,乘以一个校正因素 f 以消除有机质在 220nm 长处的光吸收干扰。进而得到土壤中硝态氮的含量。 二、试剂盒的组成和配制: 试剂名称 规格 试剂名称保存要求 备注 试剂一 粉剂 g×1 4℃保存 临用前先加 50mL 的蒸馏水,全部 转移到量筒(自备)中,再加蒸馏 水定容至 600mL标准品 液体×1 4℃保存 若重新做标曲,则用到该试剂 三、所需的仪器和用品: 酶标仪、96 UV 板(用于紫外光波长下的测定)、蒸馏水、天平、常温离心机、量筒、 振荡培养箱。 四、土壤硝态氮的测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费! 1、样本处理 取约 1g 新鲜土样,若鲜土呈松散状,尽可能过 40 目筛网备用。 【注】: 1、土壤经风干或烘干易引起 NO3-N 变化,故一般都用新鲜土样测定。 2、硝酸根为阴离子,不为土壤胶体吸附,且易溶于水,很易在土壤内部移动,在土壤剖面上 下层移动频繁,因此测定硝态氮时注意采样深度。 2、上机检测: ① 酶标仪预热 30min 以上。 ② 在 5mLEP 管中加入: 测定管 空白管(仅做一次) 鲜土(g1 试剂一(mL5 5 25℃,220rpm/min 往复式振荡培养 1h混匀(成浑浊液状态)用慢速定性滤纸过滤,澄清的滤液待测。 200μL 滤液至 96 孔板中,220nm 分别读吸光值 A1A2,再于 275nm 分别读吸光值 A3A4A 测定管=A1-(A3×f)A 空白管=A2-(A4×f) △A=A 测定管-A 空白管 注:f 为矫正因素 2.23【注】若测定管于 220nm A 值大于 1,需用试剂一稀释滤液使 A220nm 的值在 1 以内, 稀释倍数 D 需代入公式计算。本试剂盒仅供科研使用 五、结果计算: 1、标准曲线方程:y = 0.1305x - 0.0017x 为标准品浓度(μg/mL),y 为吸光值A。 2、土壤硝态氮(NO3 --N)含量(mg/kg 鲜土)=(A+0.0017)÷0.1305×V÷W×D =38.32×(A+0.0017)÷W×D V---反应总体积,5mLD---稀释倍数,未稀释即为 1W---实际称取鲜土质量,g【注】:*低检出限为 0.5μg/g附:标准曲线制作过程: 1 制备标准品母液(100μg/mL)。 2 用试剂一把母液稀释成六个浓度梯度的标准品:0, 1, 2, 3, 4, 5. μg/mL。也可根据实 际样本来调整标准品浓度。 3 直接取不同浓度的标准品 200μL 96 孔板中,分别于 220nm 275nm 读吸光值 A1A2A 标准品=A1-(A2×f)。根据结果即可制作标准曲线。 2

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