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土壤脂肪酶(S-LPS)试剂盒

更新时间:2024-05-31

简要描述:

土壤脂肪酶(S-LPS)试剂盒
脂肪酶(EC 3.1.1.3)是一种特殊的酯键水解酶,能催化天然油脂水解,,在食品、医药、洗 涤剂和皮革等许多工业领域中都有广泛的应用

土壤脂肪酶(S-LPS)试剂盒

土壤脂肪酶(S-LPS)试剂盒

本试剂盒仅供科研使用 1 土壤脂肪酶(S-LPS)活性试剂盒说明书 (货号:WS8330F 分光法 48 样) 一、产品简介: 脂肪酶(EC 3.1.1.3)是一种特殊的酯键水解酶,能催化天然油脂水解,,在食品、医药、洗 涤剂和皮革等许多工业领域中都有广泛的应用, 本试剂盒提供一种简单、快速的检测方法,以对硝基*酚酯作为底物,脂肪酶水解底物 产生具有颜色的对硝基*酚,在405nm波长下测定其吸光值,即可得出脂肪酶活力。 二、试剂盒的组成和配制: 试剂名称 规格 保存要求 备注 试剂一 A 液:μL×3 B 液:5mL×1 -20℃保存 临用前甩几下,使微量 A 液体落到底 部,再向每支 A 液中加入 2mLB 液, 混匀备用,用不完的试剂仍-20℃保存。 试剂二 液体 35mL×1 4℃保存 标准品 粉体 mg×1 4℃保存 若重新做标曲,则用到该标曲。 三、所需的仪器和用品: 可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、可调式移液枪、蒸馏水。 四、土壤脂肪酶(S-LPS)活性测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本制备: 取新鲜土样或风干(可 37 度烘箱风干)土样,先粗研磨,过 40 目筛网备用。 【注】:土壤风干,减少土壤中水分对于实验的干扰;土壤过筛,保证取样的均匀细腻; 2、上机检测① 可见分光光度计预热 30 min,调节波长到 405 nm,蒸馏水调零。 ② 在 EP 管中依次加入: 试剂名称(μL测定管 空白管(仅做一次) 土壤样本(g0.15g 试剂一 80 80 试剂二 680 680 混匀,30℃条件振荡反应 20min,立即于 4℃,12000rpm 离心 10min,取出全部上清液至 96 孔板中,于 405nm 处读取吸光值 AA=A 测定-A 空白。 【注】若ΔA 值在零附近,可以延长反应时间 T(如至 40min 或更长),或增加土壤样本量 W(如 增至 0.2g),则改变后的反应时间 T 和土壤样本质量 W 需代入公式重新计算。 五、结果计算: 1、标准曲线方程:y = 0.0182x - 0.0037x 是标准品摩尔质量(nmol),y 是ΔA本试剂盒仅供科研使用 2 2、酶活定义:每小时每克土样释放出 1nmol 对硝基*酚的酶量定义为一个酶活力单位。 S-LPS(nmol/h/g 干土)=[(A+0.0037)÷0.0182]÷W÷T=164.8×(A+0.0037) ÷W T---反应时间,20 min=1/3hW---土壤样本实际取样量,g附:标准曲线制作过程: 1 制备标准品母液(20μmol/mL):向标准品 EP 管里面加入 1ml 蒸馏水。 2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品:0, 0.8, 1.6, 2.4, 3.2, 4μmol/mL。也可根据实际 样本来调整标准品浓度。 3 96 孔板中加入:20μL 标准品+80μL B +660μL 试剂二,混匀,于 405nm 读取吸光值,根据结果制作标准曲线。

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