血磷含量检测试剂盒（磷钼酸法）,微板法

血磷含量检测试剂盒（磷钼酸法）,微板法

血磷含量检测试剂盒（磷钼酸法）,微板法

本试剂盒仅供科研使用 1 血清磷含量（磷钼酸法）检测试剂盒说明书 （货号：WS6121W 微板法 96 样） 一、产品简介： 样品中的无机磷与钼酸作用生成磷钼酸，后者被还原成钼蓝，在 660nm 处有最大吸 收峰，进而计算得出无机磷含量。 二、试剂盒组分与配制： 试剂名称 规格 保存要求 备注 试剂一 液体 40mL×1 瓶 4℃保存 试剂二 液体 1.5mL×1 瓶 4℃保存 试剂三 液体 13mL×1 瓶 4℃保存 标准品 液体 0.5mL×1 支 4℃保存 该 标 准 品 母 液 为 3.25mmol/L ， 用 前 取 0.02mL标准品+0.48mL试剂一（稀释 25 倍） 混匀制成 0.13 mmol/L 磷标准品，待用。 三、所需仪器和用品： 酶标仪、96 孔板、可调式移液器、离心机、蒸馏水。 四、磷含量检测： 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实 验样本和试剂浪费！ 1、 样本制备： 取约 0.02mL 血清至 2mLEP 管中，加 0.38mL 的试剂一（即蛋白沉淀剂），3000rpm 室 温离心 5min，取上清液检测。 2、上机检测： 1 酶标仪预热 30min，设定波长到 660nm。 2 所有试剂解冻至室温，按照试剂二：试剂三为 1:9 配制反应 mix（4℃避光保存 2 天）。 ③ 在 96 孔板中依次加入： 【注】若样本 A 测定值接近空白管，可在样本前处理步骤中增加血清取样量 V1（如取 0.1mL 血清加 0.3mL 试剂一，混匀离心再取上清液检测），则改变后的 V1 需代入公式重新计算。 五、结果计算： 磷含量(mmol/L)=C 标准×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×V÷V1 =2.6×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) C 标准--磷标品浓度，0.13 mmol/L；V--上清液总体积，0.4mL；V1--血清取样体积，0.02mL； 试剂名称（μL） 测定管 标准管（仅测一次） 空白管（仅测一次） 样本 100 标准品 100 试剂一 100 反应 mix 100 100 100 混匀，室温放置 10min，于波长 660nm 处读取各管吸光度 A。