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溶jun酶(LZM)试剂盒,微板法

更新时间:2024-05-28

简要描述:

溶jun酶(LZM)试剂盒,微板法
溶*酶又叫胞壁质酶或 N-乙酰胞壁质聚糖水解酶。能催化某些细菌细胞壁多糖的水解, 从而溶解这些细菌的细胞壁,起到杀死细菌的作用。

溶jun酶(LZM)试剂盒,微板法

溶jun酶(LZM)试剂盒,微板法

本试剂盒仅供科研使用 1 溶*酶(LYS/LZM)检测试剂盒说明书 (货号:WS7021W 微板法 96 样) 一、产品简介: 溶*酶又叫胞壁质酶或 N-乙酰胞壁质聚糖水解酶。能催化某些细菌细胞壁多糖的水解, 从而溶解这些细菌的细胞壁,起到杀死细菌的作用。 溶*酶可使一定浓度的浑浊菌液降解,使浊度降低,透光度增加,可通过光度变化来测 定溶*酶活性大小。 二、试剂盒组分与配制: 试剂名称 规格 保存要求 备注 试剂一 液体 30mL×1 4℃保存 试剂二 粉剂 mg×1 4℃干燥保存 临用甩几下使粉剂落入底 部,再加 22mL 试剂一涡旋 振荡,至全部溶解备用。 标准品 粉剂 mg×1 -20℃保存 三、所需仪器和用品: 酶标仪、96 孔板、可调式移液器、水浴锅/恒温培养箱、离心机、蒸馏水。 四、溶*酶(LYS/LZM)活性检测: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定了解本批样品情况熟悉实验流程避免实 验样本和试剂浪费1、 样本制备: ① 液体样本:澄清的液体直接检测,若浑浊则离心后取上清液检测。 ② 组织样本:取约 0.1g 组织,加入 1mL 生理盐水,进行冰浴匀浆。4℃×12000rpm 10min,取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取。 2、上机检测: ① 酶标仪预热 30min,设定温度 37℃,设定波长到 530nm② 标准品制备:临用前甩几下使粉剂落入底部,再1mL 蒸馏水充分溶解,再用蒸馏水 稀释 100 倍(即 199),终浓度为 200U/mL,即 10μg/mL③ 所有试剂在 37℃条件下孵育 5min,在 96 孔板中依次加入: 试剂(μL测定管 标准管(仅做一次) 样本 20 标准品 20 试剂二 200 200 混匀,30s 530nm 读取吸光值 A12min30s 时再 读取 A2A=A1-A2【注】:1.加完试剂二反应即开始,若是批量检测,建议加完样本后,用排枪加试剂二,避本试剂盒仅供科研使用 2 免加样时间造成测定误差或者分批测定样本。 2.A2 的值小于 0.2,可对样本用蒸馏水稀释后再测定。稀释倍数 D 代入公式计算。 3.若测定管的A 小于 0.005,可增加样本上清液体积 V2(如增至 50μL,则标准管多加 30μL 蒸馏水,保证两管总体积一致),则改变后的 V2 代入计算公式重新计算。 五、结果计算: 1、按照体积计算: 溶*酶含量(μg/mL)=C 标准×A 测定管÷A 标准管×D=10×A 测定管÷A 标准管×D 2、按样本鲜重计算: 溶*酶含量(μg/g)=(C 标准×V1)×A 测定管÷A 标准管×D÷(W×V2÷V) =10×A 测定管÷A 标准管÷W×D 3、按样本蛋白浓度计算: 溶*酶含量(μg/mg prot)=(C 标准×V1)×A 测定管÷A 标准管×D÷(Cpr×V2÷V) =10×A 测定管÷A 标准管÷Cpr×D C 标准---标品浓度,200U/mL,即 10μg/mLV1---标准品加样体积,20μL=0.02mLV2---样本加样体积,20μL=0.02mLD---稀释倍数,未稀释即为 1V ---提取液,1mLW---取样质量,gCpr---样本蛋白质浓度,mg/mL;建议使用本公司的蛋白含量测定试剂盒。

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