更新时间:2024-05-28
肌酐 (Cr) 含量试剂盒,微板法肌酐(Creatinine,CRE)是肌肉代谢的产物,主要通过肾小球滤过排出体外。在正常情况下, 体内肌酐的含量基本稳定。
肌酐 (Cr) 含量试剂盒,微板法
肌酐 (Cr) 含量试剂盒,微板法
本试剂盒仅供科研使用 1 肌酐(CRE)含量(肌氨酸氧化酶法)检测试剂盒说明书 (货号:WS4021W 微板法 96 样) 一、产品简介: 肌酐(Creatinine,CRE)是肌肉代谢的产物,主要通过肾小球滤过排出体外。在正常情况下, 体内肌酐的含量基本稳定。血液中的肌酐浓度可作为检测肾小球滤过功能的指标之一。 本试剂盒利用肌酐酶特异作用于肌酐生成肌酸,肌酸在肌酸酶和肌氨酸氧化酶的相继作用下 生成过氧化氢,过氧化氢与显色剂反应呈现紫色,该有色物质在546nm有最大吸收峰,进而计 算得到肌酐含量。 二、试剂盒组分与配制: 试剂名称 规格 保存要 求 备注 试剂一 液体 18mL×1 瓶 4℃保存 试剂二 液体 6mL×1 瓶 4℃保存 标准管 粉体 2mg×1 支 4℃保存 用前甩几下使粉体落入底部,再加 1mL蒸馏水溶解即标准品浓度为 2mg/mL,再用蒸馏水稀释40倍 (1:39份水)成0.05mg/mL,即 442μmol/L的肌酐标准品待检液。 三、所需仪器和用品: 酶标仪、96 孔板、可调式移液器、离心机、蒸馏水。 四、肌酐含量检测: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本 和试剂浪费! 1、样本制备: ① 组织样本: 取约 0.1g 组织样本,加 1mL 的提取液研磨,粗提液全部转移到 EP 管中,12000rpm,常温 离心 10min,上清液待测。 ② 液体样品:澄清的液体可直接检测;若浑浊则离心后取上清液检测。 2、上机检测: ① 酶标仪预热 30min,设置温度在 37℃,设定波长到 546nm。 ② 做实验前选取 2 个样本,找出适合本次检测样本的稀释倍数 D。 ③ 所有试剂解冻至室温,在 96 孔板中依次加入: 试剂名称(μL) 测定管 空白管 (仅做一次) 标准管 (仅做一次) 样本 6 蒸馏水 6 标准品 6 试剂一 180 180 180本试剂盒仅供科研使用 2 混匀,37℃孵育 5min,于 546nm 处读取吸光值 A1。 试剂二 60 60 60 混匀,37℃孵育 5min 后于 546nm 处读取吸光值 A2, △A=A2-A1。 【注】:1. 测定管的 A 大于 0.5,须用蒸馏水对样本进行稀释,稀释倍数 D 代入计算公式。 2. 若△A 的值小于 0.005,可增加样本加样体积 V1(如由 6μL 增至 10μL 或更多,则试剂二相应 减少,空白管和标准管变化同测定管),或增加样本取样质量 W;则改变后的 V1 和 W 需代入公 式重新计算。 五、结果计算: 1、按照质量计算: 肌酐含量(nmol/g)=(C 标准×V2)×(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空白)÷(V1÷V×W)×D =442×(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空白)÷W×D 2、按照体积计算: 肌酐含量(μmol/L)=(C 标准×V2)×(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空白)÷V1×D =442×(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空白)×D C 标准---肌酐标品,0.05mg/mL=442μmol/L=442nmol/mL;Mr---肌酐分子量,113; V1---加入样本体积,0.006mL; V2---加入标准品体积,0.006mL; V---提取液体积,1mL; W---质量,g; D---稀释倍数,未稀释即为 1。