产品中心您现在的位置:首页 > 产品展示 > > 生化试剂盒 > 蛋白含量(SP)试剂盒(双缩脲法)

蛋白含量(SP)试剂盒(双缩脲法)

更新时间:2024-05-27

简要描述:

蛋白含量(SP)试剂盒(双缩脲法)
在碱性溶液中,凡分子中含二个或二个以上酰胺基(—CO-NH2)或与此相似基团的化合物均与二价铜离子作用,络合物呈紫色,这一反应称双缩脲反应。

蛋白含量(SP)试剂盒(双缩脲法)

蛋白含量(SP)试剂盒(双缩脲法)

本试剂盒仅供科研使用 1 双缩脲法蛋白含量测定试剂盒说明书 (货号:WS2340F 分光法 96 ) 一、产品简介: 在碱性溶液中,凡分子中含二个或二个以上酰胺基(—CO-NH2)或与此相似基团的化合 物均与二价铜离子作用,络合物呈紫色,这一反应称双缩脲反应。蛋白质分子含有众多肽 (—CONH—),可发生双缩脲反应,且呈色强度在一定浓度范围内与蛋白质含量成正比, 经光谱扫描 540nm 为最大吸波长。 二、试剂盒组分与配制: 试剂名称 规格 保存要求 备注 提取液 液体 100mL×1 试剂 A 液体 45mL×1 4℃避光保存 依据实验用量,临用前试剂 A:B:超纯水=5:3:2 的比例混匀成 反应 mix4℃避光保存两周试剂 B 液体 27mL×1 4℃保存 标准品 液体 1mL×1 4℃保存 三、所需的仪器和用品: 可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、台式离心机、恒温水浴锅、移液器。 四、蛋白含量测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本制备: ① 组织样本: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液冰浴匀浆,12000rpm4℃离心 10min,取上清, 即待测液。 ② 细菌或细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液; 超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次), 12000rpm4℃离心 10min,取上清,即待测液。 ③ 液体样本:澄清无色液体样品可以直接测定。若浑浊,离心后取上清检测。 2、上机检测 ① 可见分光光度计预热 30min,调节波长到 540 nm,蒸馏水调零。 ② 可先取 2 个样本预测,确定适合本批样本的浓度,若需要可用蒸馏水进行稀释,稀释 倍数 D 代入公式计算。 ③ 在 2mL EP 管中依次加入: 试剂名称(μL测定管 标准管 (只做一次) 空白管 (只做一次) 样本 100 标准品 100 蒸馏水 100 反应 mix 900 900 900 混匀,于 37℃保温 10min,全部转移到 1mL 玻璃比色皿中, 540nm 处测定吸光值 A,△A= A 测定-A 空白。本试剂盒仅供科研使用 2 五、结果计算: 1、蛋白含量(mg/g 鲜重)=(C 标准×V1)×A÷(A 标准-A 空白)÷(W×V1÷V)×D =10×A÷(A 标准-A 空白)÷W×D 2、蛋白含量(mg/mL)=C 标准×A÷(A 标准-A 空白)×D =10×A÷(A 标准-A 空白)×D 3、蛋白含量(μg/104 cell))=(C 标准×V1)×A÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×500)×D =0.02×A÷(A 标准-A 空白)×D C 标准---蛋白标准品浓度,10mg/mLV---提取液体积:1mLV1---加入粗提液体积:0.1mLW---样本质量:gD---稀释倍数; 500--细菌或细胞总数,500 万。 注意事项: 1 本法可测定范围为 1-10mg 蛋白质,适用于精度不高的蛋白质含量测定。 2 硫酸铵、Tris 缓冲液、EDTAPVP 和一些氨基酸等物质会对测定造成干扰。 3 工作液长期放置后若有暗红色沉淀出现,即不能使用。


留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
上海宇淳生物科技有限公司

上海宇淳生物科技有限公司

地址:上海市南航公路1981弄72号

版权所有:上海宇淳生物科技有限公司  备案号:沪ICP备19012414号-1  总访问量:181627  站点地图  技术支持:环保在线  管理登陆