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土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)试剂盒,微板法

更新时间:2024-05-23

简要描述:

土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)试剂盒,微板法
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。

土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)试剂盒,微板法

土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)试剂盒,微板法

本试剂盒仅供科研使用 土壤木质素过氧化物酶(Soil lignin peroxidaseS-Lip)试剂盒说明书 (货号:WS1330W 微板法 48 样) 一、产品简介: 木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解 酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制 等方面具有较大的应用潜力。 土壤木质素过氧化物酶(S-LiP)氧化藜芦醇生成藜芦醛,藜芦醛在 310nm 处有特征吸 收峰。通过测定 310nm 处的藜芦醛的增加速率,即可得到 S-LiP 酶活性大小。 二、试剂盒组分与配制: 试剂名称 规格 保存要求 备注 试剂一 液体 10mL×1 4℃保存 试剂二 液体μL×1 4℃保存 临用前用前甩几下使液体落入底部,再 8.73mL 蒸馏水混匀备用。 试剂三 液体μL×1 4℃保存 临用前用前甩几下使液体落入底部,取 2 个新的 EP 管,每管取 3.3μL 液体,再 2mL 蒸馏水混匀备用。 三、所需的仪器和用品: 酶标仪、96 孔板(UV 板)、天平、低温离心机、天平、空气浴/恒温震荡培养箱、甲苯四、土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)活性测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本制备: 取新鲜土样风干或者 37 度烘箱风干,先粗研磨,过 40 目筛备用。 【注】:土壤风干,减少土壤中水分对于实验的干扰;土壤过筛,保证取样的均匀细腻; 2、上机检测: 1 酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 310nm2 所有试剂至常温(25℃)状态。 3 EP 管中依次加入: 试剂名称(μL测定管 对照管 土样(g0.1 0.1 甲苯 30 30 25℃静置 15min 试剂一 200 蒸馏水 200 试剂二 60 60 试剂三 40 40 30℃震荡(空气浴)反应 3h12000rpm4℃离心 10min,取上清 200μL 移至 96 孔板中,于 310nm 处读取吸光值 AA=A 测定- A 对照(每个样本做一个自身对照)。 【注】若A 值较低,可加大土壤样本量或者延长反应时间,则改变后的样本质量 W 和反应时间 T 需代入计算公式重新计算。本试剂盒仅供科研使用 2 五、结果计算: 酶活性定义:每克土壤每天氧化 1nmol 藜芦醇生成藜芦醛所需的酶量为一个酶活力单位。 S-LiP 活性(nmol/d /g 土样)=(A÷ε÷d)×109×V÷W÷T=567.7×A÷W ε---藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cmd---比色皿光径,0.5cmV---反应总体积,0.33mL=0.33×10-3LW---样本质量,gT---反应时间,3h=1/8d

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