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天冬酰胺(Asn)含量试剂盒

更新时间:2024-06-12

简要描述:

天冬酰胺(Asn)含量试剂盒
冬酰胺(Asn)是20种天然氨基酸之一,被所有生物用于蛋白质合成。在人类中是一种非必需氨基酸,因为它可以在体内由天冬氨酸和谷*酰胺合成。

天冬酰胺(Asn)含量试剂盒

天冬酰胺(Asn)含量试剂盒

一、产品简介:
冬酰胺(Asn)是20种天然氨基酸之一,被所有生物用于蛋白质合成。在人类中是一种非必需氨基酸,因为它可以在体内由天冬氨酸和谷*酰胺合成。
本试剂盒利用天冬酰胺酶使天冬酰胺分解成天冬氨酸和NH4+,接着在谷*酸脱氢酶作用下使NH4+和α-酮戊二酸反应,同时使NADH氧化,通过检测NADH在特异吸收波长340nm处的下降量,进而计算出天冬酰胺(Asn)的含量。

二、所需的仪器和用品:
紫外分光光度计、1mL石英比色皿(光径1cm)、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水。

三、所需的仪器和用品: 酶标仪、96 UV 板(用于紫外光波长下的测定)、蒸馏水、常温离心机,可调式往返 振荡机。 四、蔬菜中硝酸盐含量测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解样本自身情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本处理: ① 组织样本:取 0.2g 组织样本(若样本较大可研磨粉碎后取样),加 1mL 的蒸馏水 研磨匀浆,全部转移至 2mLEP 管中,再依次加入 0.06mL 试剂一和 10mg 的活性炭 混匀,放置于可调式往返振荡机上(200 /min)振荡 30min(如无此仪器需间隔 3min 手动晃动几秒)。再依次加入 0.02mL 的试剂二和 0.02mL 的试剂三,充分混匀,加 0.9mL 蒸馏水定容至 2mL,混匀后室温放置 5min12000rpm 室温离心 5min,澄清 的上清液做为样本待检上清液;空白待检上清液制备过程除了不加样本之外,其他 操作步骤同组织样本制备过程。 2、上机检测: 1 酶标仪预热 30min 以上。 2 96 UV 板中依次加入: 试剂名称(μL) 测定管 空白管(仅做一次) 样本待检测上清液 200 空白待检测上清液 200 混匀, 于 219nm 分别读吸光值 AA=A 测定管-A 空白管。 【注】 若 A 值超过 1.2,可用蒸馏水对待检上清液稀释,稀释倍数 D 代入计算公式重新计算; 五、结果计算: 1、标准曲线方程:y = 0.0348x + 0.0029x 为标准品浓度(μg/mL),y 为吸光值A。

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