天冬酰胺（Asn)含量试剂盒

天冬酰胺（Asn)含量试剂盒

天冬酰胺（Asn)含量试剂盒

一、产品简介：
冬酰胺（Asn）是20种天然氨基酸之一，被所有生物用于蛋白质合成。在人类中是一种非必需氨基酸，因为它可以在体内由天冬氨酸和谷*酰胺合成。
本试剂盒利用天冬酰胺酶使天冬酰胺分解成天冬氨酸和NH4+，接着在谷*酸脱氢酶作用下使NH4+和α-酮戊二酸反应，同时使NADH氧化，通过检测NADH在特异吸收波长340nm处的下降量，进而计算出天冬酰胺（Asn）的含量。

二、所需的仪器和用品：
紫外分光光度计、1mL石英比色皿（光径1cm）、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水。

三、所需的仪器和用品： 酶标仪、96 孔 UV 板（用于紫外光波长下的测定）、蒸馏水、常温离心机，可调式往返 振荡机。 四、蔬菜中硝酸盐含量测定： 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解样本自身情况，熟悉实验流程，避免实验 样本和试剂浪费！ 1、样本处理： ① 组织样本：取 0.2g 组织样本（若样本较大可研磨粉碎后取样），加 1mL 的蒸馏水 研磨匀浆，全部转移至 2mLEP 管中，再依次加入 0.06mL 试剂一和 10mg 的活性炭 混匀，放置于可调式往返振荡机上（200 次/min）振荡 30min(如无此仪器需间隔 3min 手动晃动几秒)。再依次加入 0.02mL 的试剂二和 0.02mL 的试剂三，充分混匀，加 0.9mL 蒸馏水定容至 2mL，混匀后室温放置 5min。12000rpm 室温离心 5min，澄清 的上清液做为样本待检上清液；空白待检上清液制备过程除了不加样本之外，其他 操作步骤同组织样本制备过程。 2、上机检测： 1 酶标仪预热 30min 以上。 2 在 96 孔 UV 板中依次加入： 试剂名称（μL) 测定管 空白管（仅做一次） 样本待检测上清液 200 空白待检测上清液 200 混匀， 于 219nm 分别读吸光值 A，△A=A 测定管-A 空白管。 【注】 若 A 值超过 1.2，可用蒸馏水对待检上清液稀释，稀释倍数 D 代入计算公式重新计算； 五、结果计算： 1、标准曲线方程：y = 0.0348x + 0.0029；x 为标准品浓度（μg/mL），y 为吸光值△A。