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亮an酸氨基肽酶(LAP)试剂盒

更新时间:2024-06-05

简要描述:

亮an酸氨基肽酶(LAP)试剂盒
BCA 蛋白含量试剂盒提供一种简单,快速,耐去污剂(最多 5%)的检测蛋白质浓度 的方法。

亮an酸氨基肽酶(LAP)试剂盒

亮an酸氨基肽酶(LAP)试剂盒

一、产品简介: BCA 蛋白含量试剂盒提供一种简单,快速,耐去污剂(最多 5%)的检测蛋白质浓度 的方法。由于蛋白质能将Cu2+还原成Cu+BCA可与Cu+结合生成紫蓝色复合物,在562nm 处有最大光吸光值,颜色的深浅与蛋白含量成正比,因此可根据吸光值测定蛋白质浓度。 二、试剂盒组分与配制: 试剂名称 规格 保存要求 备注 试剂 A 液体 50mL×1 4℃保存 依据实验用量,临用前试剂 A:B=50:1 的比例混匀成反应 mix 试剂 B 液体 1mL×1 4℃保存 标准品 液体 1.5mL×1 4℃保存 若重新做标曲,则用到该试剂 三、所需的仪器和用品: 酶标仪、96 孔板、台式离心机、恒温水浴锅、移液器和蒸馏水。 四、蛋白含量测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本制备: ① 组织样本: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液(提取液可选用酶提取缓冲液、蒸馏水、生理盐水) 冰浴匀浆,12000rpm4℃离心 10min,取上清,即待测液。 【注】:依据研究经验,一般需将样本粗提液稀释到适当倍数再进行测定,如 10 倍。实验前可以先选 2 个样本测定,摸索确定适合本次实验的稀释倍数。 ② 细菌或细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液; 超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次), 12000rpm4℃离心 10min,取上清,即待测液。 【注】:依据研究经验,一般需将样本粗提液稀释到适当倍数再进行测定,如 10 倍。实验前可以先选 2 个样本测定,摸索确定适合本次实验的稀释倍数。 ③ 液体样本:澄清无色液体样品可以直接测定。若浑浊,离心后取上清检测。 2、上机检测: ① 酶标仪预热 30min,调节波长到 562 nm反应 mix 置于 60℃水浴预热 30 min仅煮一次即可)。 试剂名称(μL测定管 空白管(只做一次) 样本 5 蒸馏水 5 反应 mix 200 200 混匀,于 60℃保温 30min,全部转移到 96 孔板, 562nm 处测定吸光值 A,△A= A 测定-A 空白。 【注】:若A1.5,需将样本用提取液稀释后再测定。

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