更新时间:2021-12-23
GelStain核酸电泳染料:超灵敏/超稳定的第三代荧光核酸染料,实验表明在凝胶染色浓度下无致突变性, 通过荧光共振能量转移FRET的*设计改善了同类产品对大片段DNA条带拖尾模糊的现象 带形清晰整齐,定量准确, 染色均匀, 灵敏度高, 稳定性高。
GelStain核酸电泳染料
特点:
1. 条带美观:克服了染料10000X GelRed分不开大片段DNA的缺点,条带清晰整齐美观。
2. 相对安全:*油性大分子(分子量>1000)使其不易穿透活细胞膜进入细胞,大分子的染料远超过DNA双螺旋间的尺寸,使其难以插入DNA双链内从而可能引起突变。实验表明在工作浓度(凝胶染色浓度)下该染料的没有EB类似的诱变性,使用相对安全,可以代替致癌物溴化乙锭EB作为各种核酸电泳的染色剂。
3. 迁移率好:EB小分子很快跑出胶外,所以EB容易导致小DNA段看不清,改善了这一缺点。
4. 定量准确:适用于代替EB进行核酸分子大小的确定和定量,EB对小DNA段定量不准确。
5. 染色均匀:整个凝胶负一边和正一边的亮度一样。克服了EB会导致胶的整体背景高发白,经常出现阴阳背景(胶的背景一部分亮一部分暗);长时间/长距离的电泳,EB信号强度会相应下降的缺点。
6. 灵敏度高:亮度高灵敏度高于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green。
7. 稳定性高:耐热,可加在缓冲液里,100℃溶解凝胶,防止染色剂没充分混匀。适用于微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶。
8. 耐光性强:实验室的日常环境下可以常温放置24个月以上(不能太阳光照射和紫外灯照射)。
9. 信噪比好:样品荧光信号强,背景信号低。
10. 操作简单:与EB用法*一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗。
11. 应用范围:核酸染料、核酸检测:适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA 或RNA 染色。
12. 兼容性好:适合紫外凝胶透射仪;和适合蓝光仪和可见光仪器。与EB有相近的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置:标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用,使用和EB相同紫外凝胶透射仪,在300nm紫外光附近可得到最佳激发。
GelStain核酸电泳染料
操作步骤:
一、琼脂糖凝胶电泳染色(详细方法请与销售人员索要说明书,推荐方法)
将Nucleic Acid Dye加入凝胶中
1.制胶:常规方法制备琼脂糖凝胶, 加入试剂使其在凝胶中的终浓度为1x (例如: 制备50ml的凝胶, 加入染料5μl),轻轻摇匀后倒胶。
2.按常规方法电泳,观测结果。
二、泡染法
(1)按照以上常规方法进行电泳。 用于胶回收等高浓度DNA样品强烈推荐泡染法!
(2)将Red10,000×储液稀释约10000倍到水中制成1×染色液。
(3)将凝胶小心地放入合适的容器中(如聚丙烯容器中)缓慢加入足量的1× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含1%的琼脂糖凝胶,染色时间约30min。
(4)用302nm激发的紫外凝胶成像系统观察结果。