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ecl超敏发光液在使用中务必要注意的操作步骤
更新时间:2019-04-24   点击次数:1471次
   ecl超敏发光液在使用中务必要注意的操作步骤
  ecl超敏发光液的产品特点:
  1、具有*灵敏度和高信噪比,可检测10-100fg抗原;
  2、可在自然光下进行操作,无需进入暗室;
  3、发光迅速,发光持续时间场;
  4、可使用更高的抗体稀释倍数(1:2000-1:10000)极其节省抗体。
  ecl超敏发光液使用的操作步骤
  1.在二抗孵育完毕后,将发光液从冰箱取出到室温平衡。将印迹膜充分洗涤。
  2.根据需要量,将ECL超敏发光液A和ECL超敏发光液B按照1:1的比例等体积混合,配制为化学发光检测底物工作液(例如:一张8cm×6cm的膜使用2ml工作液,为节省试剂,初次实验可用洗涤缓冲液测试,以少的液体盖住整个膜的表面)。
  3.弃去洗涤缓冲液,转移到暗室或者避光盒里操作,将发光底物工作液滴加在印迹膜上,确保工作液覆盖整张膜,室温孵育5分钟。
  4.去掉多余发光底物工作液,将印迹膜置于两层干净的塑料薄膜之间,此过程应小心完成,避免膜与膜之间产生气泡。
  5.在暗室内进行X-光胶片曝光,或将膜放置到荧光、化学发光成像仪内,按照仪器说明书进行检测。
  6.因本产品发光发光超度高,发光时间长,所以为得到理想的结果,可多次曝光(不同时长)以得到理想的结果。
  ecl超敏发光液使用的注意事项
  1.为获得好的实验结果,请务必优化实验条件,包括检测样品的用量、一抗、二抗稀释度、杂交膜及封闭试剂的选择,并且发光液请现用现配。
  2.建议在封闭缓冲液及所有抗体稀释液中加入高质量的吐温-20(终浓度为0.05%),以减少非特异性结合。
  3.由于叠氮钠是HRP抑制剂,在缓冲液中应避免使用叠氮钠作为防腐剂。
  4.免疫印迹实验进行全过程中,请确保印迹膜始终处于湿润状态,避免干燥。
  5.在与膜发生接触过程中请佩戴手套或者使用洁净镊子,避免蛋白污染。
  6.实验过程中,请使用洁净器材。保证非金属设备没有明显划痕,金属设备表面无锈。锈可能导致膜上带有污点或者高背景。
  以上便是今天关于ecl超敏发光液在使用中务必要注意的操作步骤的全部分享了,希望对大家今后使用本设备能有帮助。
  
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