CCK-8试剂盒利用了同仁化学研究所(Dojindo)开发的四唑盐——WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)，它在电子载体1-MethoxyPMS存在的情况下能够被还原成水溶性的甲臜染料。
 

　　CCK-8试剂盒的检测步骤：
 

　　1、向各孔中加入100μl细胞悬液。
 

　　2、在37℃下预孵育培养板。
 

　　3、向各孔中加入各浓度的待测溶液10μl。
 

　　4、37℃下孵育。
 

　　5、向各孔中加入10μl的CCK-8溶液。
 

　　6、37℃下孵育1-4小时。
 

　　7、测定450nm处的OD值。
 

　　CCK-8试剂盒的使用注意事项：
 

　　(1)使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。
 

　　(2)建议使用CO2培养箱过夜预培养。
 

　　(3)使用培养基或PBS来制备溶液。
 

　　(4)如果待测溶液有还原性，测定不含细胞，但含有CCK-8的待测溶液在450nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入CCK-8，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的100μl培养基和10μlCCK-8进行检测。
 

　　(5)白细胞可能需要培养较长时间。